Idea

Dada la importancia de la obesidad en la población y las patologías asociadas a ella, este proyecto pretende contribuir a dilucidar los eventos moleculares que participan en la diferenciación de células precursoras a adipocitos que puedan ser un aporte para desarrollar nuevas terapias. Se utilizan los fibroblastos 3T3-L1 que diferencian por agregado de una mezcla que contiene insulina, dexametasona y metilisobutilxantina (MIX). MIX aumenta la concentración intracelular de AMPc. Hemos visto que EPAC, una proteína activada por AMPc, está involucrado en la diferenciación. En un análisis de microarray identificamos varios genes cuya expresión varía durante este proceso, algunos requieren la presencia de AMPc y otros no. Nos interesa identificar nuevos genes importantes en la adipogénesis y analizar su dependencia del aumento de AMPc.

Se estan estudiando dos genes aún no caracterizados en este proceso y confirmados por qRT-PCR: Cyr61, cuya expresión disminuye, y MCAM, que aumenta. Se analiza como se afecta su expresión con cada uno de los tres componentes de la mezcla de diferenciación, con inhibidores de kinasas que pueden ser activadas por estos componentes, con activadores específicos de la vía de AMPc-EPAC, y con un inhibidor del gen maestro de la adipogénesis PPAR gama. Se evalua si se afecta la diferenciación de las células 3T3-L1 con la sobreexpresión de estos genes o la inhibición de su expresión con RNAi. Además, se han informado cambios en el estado de metilación de los promotores de genes adipogénicos que están involucrados en la regulación de éstos durante la diferenciación, y también modificación de la metilación del promotor de MCAM en humanos. Dado que encontramos islas de CpG en el promotor de MCAM de ratón se analizará, en colaboración con el Dr. Gustavo Yannarelli (Fundación Favaloro), si varía su metilación entre preadipocitos y adipocitos 3T3-L1.

Investigadores Intervinientes (2)

María del Carmen Vila

Investigadora Independiente

Matías Gabrielli

Becario doctoral